紫外分光光度計(jì)測(cè)量可按「測(cè)量前準(zhǔn)備→校準(zhǔn)→樣品測(cè)量→測(cè)量后維護(hù)」四步完成,完整操作流程如下:
一、測(cè)量前準(zhǔn)備工作
環(huán)境與儀器檢查:將儀器放置在平穩(wěn)無(wú)震動(dòng)、避開(kāi)陽(yáng)光直射與強(qiáng)電磁干擾的臺(tái)面,確認(rèn)電源接地良好,檢查樣品室無(wú)雜物或遺留防潮劑。
開(kāi)機(jī)預(yù)熱自檢:打開(kāi)儀器電源,等待儀器完成自動(dòng)自檢,預(yù)熱15-30分鐘讓光源穩(wěn)定,帶電腦工作站的儀器需同步打開(kāi)操作軟件。
樣品與耗材準(zhǔn)備:根據(jù)波長(zhǎng)選擇比色皿,紫外區(qū)用石英比色皿,可見(jiàn)光區(qū)可用玻璃比色皿;配制好待測(cè)樣品和參比溶液(通常為溶劑,如超純水、緩沖液),將溶液注入比色皿至容積的1/2~2/3;手持比色皿必須捏毛面,避免觸碰光學(xué)透光面,用擦鏡紙沿單一方向輕輕擦拭外壁,確保無(wú)液滴、指紋殘留。
二、儀器校準(zhǔn)
設(shè)置參數(shù):在儀器或軟件中選擇測(cè)量模式(定性選光譜掃描,定量選光度測(cè)定),輸入設(shè)定的測(cè)量波長(zhǎng)。
零點(diǎn)與滿度校正:將兩個(gè)裝有參比空白溶液的比色皿分別放入?yún)⒈炔酆蜆悠凡?,關(guān)閉樣品室蓋;點(diǎn)擊「自動(dòng)調(diào)零/AUTO-ZERO」完成校準(zhǔn),使透光率顯示100%(吸光度為0),多波長(zhǎng)測(cè)量需執(zhí)行基線校準(zhǔn)。
三、樣品測(cè)量
取出樣品槽的參比比色皿,倒入廢液后用待測(cè)溶液潤(rùn)洗比色皿2次,重新注入待測(cè)樣品,按規(guī)范擦拭外壁后放回樣品槽,確保光面正對(duì)光路。
關(guān)閉樣品室蓋,點(diǎn)擊測(cè)量按鈕,直接讀取儀器顯示的吸光度或透光率數(shù)值,記錄測(cè)量結(jié)果;若需測(cè)量多個(gè)樣品,依次更換即可。
四、測(cè)量后維護(hù)整理
紫外分光光度計(jì)測(cè)量完畢立即取出比色皿,用純水清洗干凈,必要時(shí)用丙酮潤(rùn)洗后晾干存放;若比色皿污染,可用無(wú)水乙醇浸泡清潔,禁止用粗糙物品擦拭劃傷光學(xué)面。
清理樣品室,若有溶液灑落及時(shí)擦拭干凈,保持樣品倉(cāng)干燥,避免光學(xué)部件被腐蝕。
先關(guān)閉操作軟件,再關(guān)閉儀器電源,整理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。